(1)电镜检查

采病犬粪便，直接或加等量 PBS后混匀，以3000r/min离心10min。

上清液加等量氯仿振动10min，再如前处理一次。

吸取上清液滴于铜网上，用2%磷钨酸(pH\u003d6.2)负染后电镜检查。

在病的初期可见到大量大小均一的直径20~22nm的圆形和六边形散在的病毒粒子，如能进行免疫电镜检查则更佳。

4、病毒分离与鉴定

常接种MDCK和F81细胞分离病毒，观察细胞病变和核内包涵体。

粪便病料可先离心，再加入高浓度抗生素或过滤除菌，最简便的病毒鉴定方法是接种后3~5d后用荧光抗体检测细胞中的病毒，或测定培养液的血凝性。

5、血清学检查

(1)国内外常用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验；

(2)血凝试验可用于测定粪便和细胞培养物中的病毒效价。

用0.5%~1%猪红细胞作指示系统；

(3)试验证明，HA＞1:80可作为阳性感染的指标标准；

(4)血凝抑制试验主要用作流行病学调查，也可用于检测粪便中的抗体。

七、防制

1、疫苗注射。

同源疫苗：

犬细小病毒灭活疫苗或弱毒疫苗，比如单价疫苗、二联苗(犬细小病毒病和传染性肝炎)、三联苗(犬瘟热、犬细小病毒病和犬传染性肝炎)和五联苗(犬瘟热、犬细小病毒病、犬传染性肝炎、狂犬病和犬副流感)。目前同源疫苗应用较多。

异源灭活苗：猫泛白细胞减少症灭活疫苗或弱毒苗。

2、严格的检疫制度。

治疗

1、心肌炎型病例转归不良，只要出现心电图变化都难免死亡。

发现肠炎型病例立即隔离饲养，加强护理；

2、采用对症疗法：呕吐注射阿托品等；

3、腹泻口服次硝酸秘、鞠酸蛋白和注射 VK、安络血等止血剂；

4、脱水输液，注意先盐后糖，最好静脉注射，先快后慢，有困难时可行腹腔输液；

结膜发绀时则加入碳酸氢钠防止酸中毒，也可口服补液ORS；

5、支持疗法和防止继发感染等治疗措施，可能获得痊愈或好转支持疗法：

i静脉输进健康犬或康复犬的全血30~200mL

ii 也可注射其血清或血浆 30~50mL

iii还可使用VC、肌苷、ATP等以增强支持疗法的效果防止继发感染。

用痢特灵、庆大霉素、红霉素、卡那霉素等抗菌和抑制病毒的药物。

?思考题

·犬细小病毒病的临床症状和病理变化？